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快看過來!你知道產(chǎn)生鬼峰的原因都有哪些嗎?

? ? ? ?近年來隨著高效液相色譜儀的檢測器靈敏度和色譜柱峰容量的提高,可以在極低濃度下進行檢測,但鬼峰問題卻成為了人們關注的焦點。恒譜生今天就跟大家聊聊鬼峰產(chǎn)生原因和解決措施吧!

一、什么是鬼峰:
? ? ? ?如果化合物出現(xiàn)的時間少于預期的保留時間,則稱為鬼峰”。這將顯示為與注入同一色譜圖的化合物具有不同保留時間的峰。色譜中的鬼峰是在小于預期保留時間的間隔內(nèi)出現(xiàn)的不需要的峰。這些峰通常是由其他化合物或代謝物與溶劑和固定相的相互作用引|起的,這會導致分離度降低,使評估分離質(zhì)量變得困難。

?恒譜生鬼峰-DSC_5060

二、鬼峰的來源:

? ? ? 鬼峰的來源通常分為三類:目標物質(zhì)以外的雜質(zhì)、LC儀器的內(nèi)部污染和流動相中的雜質(zhì)。

(1)?儀器中的雜質(zhì)

? ? ? 儀器中產(chǎn)生鬼峰的最常見原因是進樣器造成的殘留。當將針頭浸入小瓶中吸取樣品時,樣品中的物質(zhì)會成為殘留物的來源,因為它們可以吸附到針頭的內(nèi)外表面。那些即使在針頭沖洗后也沒有被去除的物質(zhì)被帶到下一個分析中,并以鬼峰的形式出現(xiàn)。由于即使在多次空白分析(僅注入流動相的分析)后也會出現(xiàn)表現(xiàn)出特別強吸附的物質(zhì),因此可能很難將自動進樣器識別為鬼峰的來源。

(2)?樣品中的雜質(zhì)

? ? ? 當樣品中存在與目標化合物吸收波長相同的雜質(zhì)時,就會產(chǎn)生鬼峰。由于來自樣品的鬼峰不會出現(xiàn)在空白注射中,因此確定來源相對容易。

(3)?流動相中的雜質(zhì)

? ? ?①流動相中因長時間使用而產(chǎn)生有機物或空氣中的有機物溶解在流動相中

? ? ?②由于長期用新流動相補足現(xiàn)有流動相而不是每天或為每組樣品準備新瓶而導致流動相被污染

? ? ?③使用受污染的有機溶劑和/或水制備流動相

? ? ?④使用受污染的流動相試劑

?鬼峰柱芯-DSC_3836

三、出現(xiàn)“鬼峰”怎么辦:

? ? ? ?如果早期峰是由于樣品引起的,那么它實際上不是鬼峰,而是分析中需要考慮的真實樣品峰。光散射是表征這些大聚集峰的一個很好的工具,因為即使沒有可用于確定摩爾質(zhì)量的濃度信號,仍然可以確定大小(RMS 半徑)和數(shù)密度。如果樣品中大顆粒的峰滲入其他樣品峰,您可以調(diào)整目標樣品峰的基線以排除較大顆粒的貢獻。如果空白注入也能看到鬼峰,那是真正的鬼峰了。

? ? ? ?要消除或防止這些鬼峰:在加載和注入步驟中使用壓力變化最小的 HPLC 系統(tǒng)。請注意,加載期間的壓力僅顯示在前面板上,通常不是 HPLC 數(shù)據(jù)文件中記錄的數(shù)據(jù)的一部分。如果鬼峰或系統(tǒng)峰在多次空白注射中可重現(xiàn),您可以使用 ASTRA 的基線減法程序從樣品注射中減去空白注射的光散射基線。選擇脫落最少的液相色譜柱。逐漸改變流速(不超過 0.1 mL/min2)以防止大的壓力變化沖擊色譜柱。

恒譜生色譜耗材-DSC_6944-1

? ? ? ?恒譜生的鬼峰捕集去除柱(又稱鬼峰捕集小柱)可以有效吸附流動相中的雜質(zhì),從而縮短了方法驗證和雜質(zhì)分析的時間。鬼峰捕集去除柱主要的特點是能夠去除溶劑包括有機溶劑中的雜質(zhì)。反相色譜梯度分析時,將鬼峰捕集小柱安裝在梯度混合器和自動進樣器之間,不僅能夠去除流動相中的雜質(zhì),還可以有效捕集管路和混合器中的雜質(zhì)。

? ? ? ?今天恒譜生分享的知識先到這啦,希望對您的工作有所幫助!

新聞底欄


發(fā)布于: 2022-12-30
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