凝膠過(guò)濾色譜（Gel filtration chromatography，GFC）是一種液相色譜技術(shù)，基于固定相的孔徑大小和分子大小對(duì)樣品進(jìn)行分離。
在凝膠過(guò)濾色譜中，固定相是一種多孔凝膠，它可以通過(guò)分子大小的差異來(lái)分離不同的化合物。凝膠過(guò)濾色譜的原理是，當(dāng)含有混合物的流動(dòng)相流經(jīng)固定相時(shí)，樣品分子會(huì)被固定相吸附或排斥，從而在固定相中滯留或快速通過(guò)。樣品分子的大小和形狀決定了它們?cè)诠潭ㄏ嘀械臏魰r(shí)間，從而實(shí)現(xiàn)分離。
凝膠過(guò)濾色譜適用于分離分子大小差異較大的樣品，如蛋白質(zhì)、多肽、DNA 等生物大分子。它具有操作簡(jiǎn)便、分離效率高、樣品回收率高、重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)，是一種常用的液相色譜技術(shù)。
在凝膠過(guò)濾色譜中，常用的固定相有葡聚糖凝膠、瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等。流動(dòng)相通常是水或緩沖液。樣品可以通過(guò)注射器或進(jìn)樣閥注入色譜柱中，然后用紫外吸收檢測(cè)器或示差折光檢測(cè)器等檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)。
凝膠過(guò)濾色譜的分離效果與凝膠的孔徑大小、交聯(lián)度、流動(dòng)相的流速、pH 值等因素有關(guān)。通過(guò)優(yōu)化這些條件，可以實(shí)現(xiàn)不同樣品的分離和純化。
發(fā)布于: 2023-09-18